（7）單要素實(shí)驗(yàn)

以紅花籽粕的水解度和復(fù)原力為實(shí)驗(yàn)指標(biāo)值，以超聲波時(shí)間、超聲波溫度、pH、酶使用量為實(shí)驗(yàn)要素，期貨操作要素實(shí)驗(yàn)，剖析各要素對(duì)紅花籽粕的水解度和復(fù)原力的危害。

（8）正交實(shí)驗(yàn)

在單要素實(shí)驗(yàn)的根基上，對(duì)危害胰蛋白酶的水解度和復(fù)原力的首要要素超聲波時(shí)間、超聲波溫度、pH、酶使用量等開展L₉（3⁴）正交實(shí)驗(yàn)，以明確胰蛋白酶酶解的最合適的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。正交試驗(yàn)要素水準(zhǔn)見表1。

二、試驗(yàn)結(jié)果與剖析

1、L-色氨酸標(biāo)曲

在光波長275nm下，測(cè)得OD值A(chǔ)，結(jié)果如表2。

以L-色氨酸濃度值為橫坐標(biāo)軸，吸光度數(shù)值縱軸得L-色氨酸規(guī)范趨勢(shì)圖1。

由圖1得到L-色氨酸規(guī)范曲線方程為：Y=0.0175X-0.0024，R²=0.9998，R²＞0.997說明L-色氨酸在0-60μg/mL濃度值范疇內(nèi)線性相關(guān)優(yōu)良。

2、超音波解決前后左右胰蛋白酶的轉(zhuǎn)變

剖析三種胰蛋白酶沒經(jīng)超聲波解決和超聲波處置的酶魅力的轉(zhuǎn)變，依據(jù)（1）計(jì)算公式出酶魅力。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，蛋白酶k的活力增強(qiáng)了2.96倍，枯草枯草芽孢菌中性化胰蛋白酶提升了1.91倍，蛋白酶的活力增強(qiáng)了1.17倍，蛋白酶k的活力提升更快，實(shí)驗(yàn)效果證實(shí)在55℃標(biāo)準(zhǔn)下要超音波解決10min推動(dòng)了酶的溶解，提升 了胰蛋白酶的魅力，由數(shù)據(jù)信息看得出蛋白酶k提高更快，因此 選擇蛋白酶k開展加工工藝科學(xué)研究。

3、單要素試驗(yàn)

（1）超聲波時(shí)長對(duì)紅花籽粕水解度的危害

在酶使用量為2.9%、pH7.0、超聲波溫度為55℃的標(biāo)準(zhǔn)下，各自測(cè)超聲波時(shí)間為5min、10min、15min、20min、25min的情形下水解反應(yīng)1h，其水解度和復(fù)原力結(jié)果如圖2、圖3所顯示。

由圖2，圖3得知，超聲波時(shí)間的更改水解度和復(fù)原力都遭受了危害，水解度在超聲波時(shí)間為10min的情況下較大，以后的由于時(shí)間提高，復(fù)原力降低顯著，可能是酶降解，水解度降低；復(fù)原力在超聲波時(shí)間為15min的情況下較大，其復(fù)原力最強(qiáng)。綜合性考慮到，覺得超聲波時(shí)間10min更為適合。

（2）超聲波溫度的對(duì)紅花籽粕水解度的危害

在酶使用量為2.9%、pH7.0、超聲波時(shí)間為10min的標(biāo)準(zhǔn)下，各自測(cè)超聲波溫度為35℃、45℃、55℃、65℃、75℃的情形下水解反應(yīng)1h，其水解度和復(fù)原力結(jié)果如圖4、圖5所顯示。

由圖4得知，起先伴隨著超聲波溫度的提升，紅花籽粕的水解度擴(kuò)大，在超聲波溫度是65℃時(shí)，水解度較大，隨后逐漸發(fā)生下降趨勢(shì)，表明在65℃以內(nèi)時(shí)可能是因?yàn)闊徂D(zhuǎn)性導(dǎo)致的水解度較大；由圖5得知，起先伴隨著超聲波溫度的提升，紅花籽粕的復(fù)原力擴(kuò)大，在超聲波溫度是55℃時(shí)，復(fù)原力較大，隨后逐漸發(fā)生下降趨勢(shì)，可是降低不顯著。綜合性考慮到水解度、復(fù)原力等要素，覺得最好超聲波溫度為65℃。