精密吸取1.2中的混合對(duì)照品溶液1、2、5、10、15、20μL,按1.4色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定,以待測(cè)化合物的質(zhì)量濃度(x)為橫坐標(biāo),色譜峰面積(y)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,計(jì)算線性方程和相關(guān)系數(shù)。
將1.2中的混合對(duì)照品溶液用50%甲醇溶液逐級(jí)稀釋,在1.4色譜條件下測(cè)定,以3倍信噪比對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度作為檢出限,以10倍信噪比對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度作為定量限。7種待測(cè)成分的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限及定量限見(jiàn)表1。
由表1可知,7種待測(cè)化合物在各自的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與色譜峰面積線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.999,方法的檢出限和定量限均滿足魚(yú)腥草芩藍(lán)合劑中7種化合物的檢測(cè)需要。
取魚(yú)腥草芩藍(lán)合劑樣品,按照1.3樣品處理方法制備樣品溶液,分別在配制完成后第1、2、4、8、12、24h進(jìn)樣,測(cè)定各待測(cè)化合物的色譜峰面積。綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素色譜峰面積測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.78%、0.81%、0.74%、0.93%、1.21%、1.01%、1.22%,表明樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。
取魚(yú)腥草芩藍(lán)合劑樣品,按1.3方法平行制備6份樣品溶液,在1.4色譜條件下分別進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素的質(zhì)量濃度,結(jié)果見(jiàn)表2。
由表2可知,綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.23%~1.76%,表明該方法精密度較好,滿足測(cè)定要求。
精密量取6份魚(yú)腥草芩藍(lán)合劑樣品各1mL,分別精密加入綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素單標(biāo)儲(chǔ)備液各1.0、1.0、2.0、0.2、5.0、0.2、0.5mL,按照1.3樣品處理方法制備加標(biāo)樣品溶液,在1.4色譜條件下分別進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算樣品加樣回收率,結(jié)果見(jiàn)表3。
由表3可知,樣品加標(biāo)平均回收率為在98.17%~101.48%,表明該方法準(zhǔn)確性良好。
建立了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定魚(yú)腥草芩藍(lán)合劑中綠原酸、連翹酯苷A、黃芩苷、槲皮苷、漢黃芩苷、槲皮素和漢黃芩素含量的方法。所測(cè)7種成分涉及4種藥材中的活性成分,涵蓋了多類指標(biāo)成分,包括2種苯丙素和5種黃酮,為魚(yú)腥草芩藍(lán)合劑的質(zhì)量控制提供了參考方法。
相關(guān)鏈接:綠原酸,連翹酯苷A,漢黃芩苷,漢黃芩素
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