紙莎草（Cyperuspapyrus）為莎草科（Cyperaceae）沙草屬（Cyperus）綠色植物，是一種又高又大的水生物或水濕生植物。紙莎草又被稱為紙草、印度沙草或印度紙草，原生在歐洲地區(qū)南邊、非州北邊及其小亞細(xì)亞地域，是組成較水深中植物群落的關(guān)鍵綠色植物。紙莎草是古埃及文明的一個(gè)主要構(gòu)成部分，古代埃及運(yùn)用其制作的撰寫媒介，曾被西方人和比利時(shí)人應(yīng)用，歷3000年長(zhǎng)盛不衰，直到公年8新世紀(jì)，我國(guó)造紙術(shù)的發(fā)明傳入中東地區(qū)替代了莎草紙。

紙莎草具備較強(qiáng)的水質(zhì)凈化處理作用，多被培植和改進(jìn)為水質(zhì)景觀植物?，F(xiàn)階段世界各國(guó)對(duì)紙莎草的分析關(guān)鍵在其污水凈化作用層面，有關(guān)其成分的探討很少，生物活性層面除開護(hù)膚美白功效外很少有報(bào)導(dǎo)。紙莎草的同科同為綠色植物沙草（C.rotundus）的干躁地下莖為《中國(guó)藥典》載于的常用中藥香附，具備解熱鎮(zhèn)痛和抗感染等活力，臨床醫(yī)學(xué)常見于治療痛經(jīng)、月經(jīng)失衡和胃腸紊亂等癥狀。核因素-κB（NF-κB）是體細(xì)胞內(nèi)主要的核轉(zhuǎn)錄因子，它參加人體的炎癥介質(zhì)和體液免疫全過程，NF-κB轉(zhuǎn)錄因子的過多激話，與人們包含癌病以外的多種多樣發(fā)炎關(guān)聯(lián)性病癥的產(chǎn)生發(fā)展趨勢(shì)密切相關(guān)，因而抑止NF-κB轉(zhuǎn)錄因子的過多活性，有可能變成有關(guān)疾病的治療方式。為了更好地深入分析紙莎草有機(jī)化學(xué)及活力成份，對(duì)紙莎草整株開展了科學(xué)研究，從這當(dāng)中分離出來評(píng)定了19個(gè)化學(xué)物質(zhì)，并看到了9個(gè)對(duì)TNF-α誘發(fā)激話的NF-κB轉(zhuǎn)錄因子有抑制效果的活力化學(xué)物質(zhì)。

1試驗(yàn)一部分

1.1綠色植物原材料

紙莎草整株由昆明市植分生物科技有限責(zé)任公司于2018年8月收集于昆明市馬金鋪，試品經(jīng)云南省中國(guó)醫(yī)藥大學(xué)李國(guó)棟副教授職稱評(píng)定為紙莎草的狼把草（Cyperuspapyrus），標(biāo)本采集（YMU-ZF20180917）儲(chǔ)存于中華民族藥資源有機(jī)化學(xué)國(guó)家民委-國(guó)家教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.2儀器設(shè)備與實(shí)驗(yàn)試劑

制取、半制取HPLC及LC/MS流動(dòng)性相常用有機(jī)溶液為色譜儀級(jí)工業(yè)甲醇和乙腈（霍尼韋爾，英國(guó)），水為礦泉水（娃哈哈集團(tuán)，我國(guó)）；其他化學(xué)藥品均為分析純；SephadexLH-20（GEHealthcare，英國(guó)）；柱色譜儀用MCIGELCHP20/P120填充料（三菱化學(xué)，日本）；薄層色譜環(huán)氧樹脂板GF254；柱色譜儀用硅橡膠（60~100、100~200、200~300、300~400目）；鉻黑T：10%磷鉬酸-乙醇溶液和小茴香醛、10%鹽酸-乙醇溶液（105℃加溫著色）、5%鹽酸-乙醇溶液、碘；DMEM培養(yǎng)液、胎牛血清、谷氨酰胺（BiologicalIndustries，非洲）；Lipofectamine2000（ThermoFisher，英國(guó)）；阿昔洛韋（Aladdin，我國(guó)）；雙熒光素酶報(bào)告基因診斷試劑盒（Promega，英國(guó)）。

EYELAN-1100全自動(dòng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海市愛朗，我國(guó)）；EYELAOSB-2100恒溫水浴鍋（上海市愛朗，我國(guó)）；NP7000泵-NU3000制取高效液相（江蘇省漢邦，我國(guó)）；6420TripleQuadLC/MS（Agilent，英國(guó)）；1260Infinity半制取高效率液相色譜儀（Agilent，英國(guó)）；DRX-400和DRX-600型數(shù)字乳腺機(jī)（Bruker，法國(guó)）；BS124S型電子器件電子分析天平（Sartorius，法國(guó)）；SpectraMaxi3x型酶標(biāo)儀（MolecularDevices，英國(guó)）；5424R型離心脫水機(jī)（Eppendorf，法國(guó)）；二氧化碳恒溫箱（ThermoFisher，英國(guó)）；5977MSD旋光儀（Agilent，英國(guó)）。

1.3實(shí)驗(yàn)方法與流程

1.3.1獲取與分離出來

紙莎草（12kg）干躁試品破碎后，用95%工業(yè)甲醇浸法獲取6次，每一次48h，合拼萃取液，萃取液經(jīng)過慮、緩解壓力濃縮后得中藥浸膏1kg。將提取液中藥浸膏混懸在適當(dāng)溫開水中，先后用乙醚、乙酸丁酯和正丁醇各提純3次，合拼提取液獲得乙醚一部分中藥浸膏75g，乙酸丁酯一部分中藥浸膏100g和正丁醇一部分中藥浸膏12g。

乙醚一部分中藥浸膏（75g）首先用MCI除黑色素及分離出來，過柱梯度方向?yàn)?0%、70%、90%、100%工業(yè)甲醇/水，經(jīng)TLC檢驗(yàn)合拼同樣成分，共獲得10個(gè)成分，各自記作FrA.1~FrA.10。70%工業(yè)甲醇/水過柱一部分（FrA.4）用60~100目硅橡膠拌樣開展正相硅橡膠柱色譜儀分離出來，過柱梯度方向系統(tǒng)軟件為乙醚∶二氯甲烷（1∶0~0∶1），經(jīng)TLC檢驗(yàn)合拼同樣成分，共獲得五個(gè)成分，各自記作A4.1~A4.5。

A4.2依次用硅橡膠及SephadexLH-20柱層析分離出來，獲得化學(xué)物質(zhì)1（10.5mg）和7（7mg）。A4.3依次用硅橡膠及SephadexLH-20柱層析分離純化，獲得化學(xué)物質(zhì)2（20mg）和9（10mg）。70%工業(yè)甲醇/水過柱一部分（FrA.5）用60~100目硅橡膠拌樣開展柱色譜儀分離出來，過柱系統(tǒng)軟件為乙醚∶二氯甲烷=1∶0→0∶1，經(jīng)TLC檢驗(yàn)合拼同樣成分，共獲得4個(gè)成分，各自記作A5.1~A5.4。A5.3依次用硅橡膠與SephadexLH-20柱層析（過柱劑：工業(yè)甲醇）分離純化，獲得化學(xué)物質(zhì)3（8mg）和4（9mg）。90%工業(yè)甲醇/水過柱一部分（FrA.8）用制取高效率液相色譜儀開展色譜儀分離出來，共獲得五個(gè)成分，各自記作A8.1~A8.5。

A8.3依次用硅橡膠與SephadexLH-20柱層析分離純化，獲得化學(xué)物質(zhì)5（22.5mg）、6（10mg）和8（8mg）。乙酸丁酯一部分中藥浸膏（100g）首先用MCI除黑色素及分離出來，過柱梯度方向系統(tǒng)軟件為50%、70%、90%、100%工業(yè)甲醇/水，經(jīng)TLC檢驗(yàn)合拼同樣成分，共獲得八個(gè)成分，各自記作FrB.1~FrB.8。70%工業(yè)甲醇/水一部分（FrB.4）用60~100目硅橡膠拌樣開展柱色譜儀分離出來，過柱梯度方向系統(tǒng)軟件為乙醚∶乙酸丁酯（1∶0→0∶1），經(jīng)TLC檢驗(yàn)合拼同樣成分，共獲得五個(gè)成分，各自記作B4.1~B4.5。B4.2依次用硅橡膠與SephadexLH-20柱層析分離純化，獲得化學(xué)物質(zhì)11（14mg）和19（23mg）。B4.3依次用硅橡膠柱層析和半制取高效率液相色譜儀開展色譜儀分離純化，各自獲得化學(xué)物質(zhì)10（18mg，tR=35min）和14（14mg，tR=40min）。

B4.4依次用硅橡膠與SephadexLH-20柱層析（過柱劑：工業(yè)甲醇）分離純化，獲得化學(xué)物質(zhì)15（15mg）。90%工業(yè)甲醇/水一部分（FrB.7）用60~100目硅橡膠拌樣開展柱色譜儀分離出來，過柱梯度方向系統(tǒng)軟件為乙醚∶乙酸丁酯（1∶0→0∶1），經(jīng)TLC檢驗(yàn)合拼同樣成分，共獲得6個(gè)成分，各自記作B7.1~B7.6。B7.3依次用硅橡膠與SephadexLH-20柱層析分離純化，獲得化學(xué)物質(zhì)12（12mg）。B7.4依次用硅橡膠柱層析、SephadexLH-20柱層析和半制取高效率液相色譜儀開展色譜儀分離純化，各自獲得化學(xué)物質(zhì)13（10mg，tR=30min）和16（8mg，tR=36min）。B7.5依次用硅橡膠柱層析與SephadexLH-20（過柱劑：工業(yè)甲醇）分離純化，獲得化學(xué)物質(zhì)17（20mg）和18（10mg）。