(3)規(guī)范曲線方程
選用明確的色譜儀標(biāo)準(zhǔn),各自對(duì)不一樣濃度值索馬甜標(biāo)液開(kāi)展測(cè)量,以規(guī)范溶液的濃度為橫坐標(biāo)軸,相匹配的峰總面積為縱軸,創(chuàng)建標(biāo)曲,結(jié)果如圖所示3所顯示。所得的索馬甜規(guī)范曲線方程為Y=3.62568X-47.04715,相關(guān)系數(shù)r為0.9983,說(shuō)明在10~500mg/L濃度值范疇內(nèi)其線性相關(guān)優(yōu)良。
(4)方法檢出限及定量限
反復(fù)測(cè)量20次含有10mg/L索馬甜的栽培基質(zhì)試品,以結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍測(cè)算出方式的方法檢出限為1.6mg/L,以結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍測(cè)算出定量限為5.3mg/L,說(shuō)明該辦法能達(dá)到食品類(lèi)中甜味素的檢查規(guī)定。
(5)利用率和精度
選用文中所確立的辦法對(duì)市面上的15個(gè)批號(hào)的飲料類(lèi)商品(包含炭酸類(lèi)飲品可口可樂(lè)、可樂(lè),茶類(lèi)飲料綠茶、綠茶葉、花草茶,果肉飲料,維他命飲品)開(kāi)展剖析檢驗(yàn),均未發(fā)覺(jué)索馬甜的驗(yàn)出,與其說(shuō)商品標(biāo)簽成份中未明確應(yīng)用索馬甜的狀況一致。
為認(rèn)證辦法的可行性分析,進(jìn)一步對(duì)飲品試品開(kāi)展加標(biāo)實(shí)驗(yàn)。在這里全過(guò)程發(fā)覺(jué),立即向各種飲品中添加索馬甜,均沒(méi)法驗(yàn)出,剖析其根本原因可能是因?yàn)楦鞣N飲品中高濃的糖成分造成蛋白質(zhì)聚沉所致使的,因而,加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)均是在對(duì)飲品開(kāi)展10倍稀釋液后的根基上加上。不一樣試品的索馬甜加標(biāo)實(shí)驗(yàn)超高效率液相色譜儀結(jié)果如圖4所顯示,索馬甜加標(biāo)回收率及精度實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。
依據(jù)表1結(jié)果,不一樣試品索馬甜加標(biāo)回收率在82.8%~102.3%,相對(duì)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均在6%之內(nèi),說(shuō)明該辦法有著優(yōu)良的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
2、SDS-PAGE統(tǒng)計(jì)分析方法的創(chuàng)建
SDS-PAGE是剖析蛋白常見(jiàn)的方式 ,可以完成判定及半定量分析。配置不一樣含量的索馬甜蛋白質(zhì)水水溶液,其SDS-PAGE結(jié)果如圖所示5所顯示。
由圖5能夠看得出,索馬甜蛋白質(zhì)雜帶超出20kD,與資料中消息的相對(duì)分子質(zhì)量22kD尺寸符合,伴隨著含量的擴(kuò)大雜帶色調(diào)慢慢加重、雜帶變大,在其中濃度值為10mg/L時(shí),蛋白質(zhì)雜帶若隱若現(xiàn),濃度值為提升至25mg/L時(shí),雜帶已更為清楚、顯著,不難看出,SDS-PAGE法達(dá)到GB2760-2014較大容許需求量0.025g/kg的剖析規(guī)定。
對(duì)各種飲品開(kāi)展10倍稀釋液后任意加上不一樣濃度值索馬甜標(biāo)液,依照上述情況的電泳分析方式實(shí)現(xiàn)解決并電泳原理,其效果如圖所示6所顯示。由圖上能夠看得出,各加標(biāo)試品電泳條帶與索馬甜規(guī)范試品一致,不難看出運(yùn)用SDS-PAGE法可以完成對(duì)飲品中索馬甜開(kāi)展剖析。
三、結(jié)果
本畢業(yè)論文各自根據(jù)超高效液相色譜色譜分析和SDS-PAGE法創(chuàng)建了飲品中索馬甜的剖析測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)試品加標(biāo)試驗(yàn),結(jié)果顯示這兩種方式均可完成對(duì)飲品中索馬甜的檢驗(yàn),其敏感度都可以達(dá)到GB2760-2014中較大限制值應(yīng)用的檢查規(guī)定。除此之外,針對(duì)比較繁雜的栽培基質(zhì)試品,根據(jù)選用這兩種辦法開(kāi)展互相證明,可以得到更加穩(wěn)定的結(jié)果。